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2016
7.18

考馬斯亮藍染色測定蛋白質(zhì)含量

考馬斯亮藍染色測定蛋白質(zhì)含量一、實驗原理考馬斯亮藍（CoomassieBrilliantBlue）測定蛋白含量存在著兩種不同顏色形式，紅色和藍色。此染料與蛋白質(zhì)結(jié)合后顏色由紅色形式轉(zhuǎn)變藍色形式，zui大光吸收由465nm變成595nm。在一定蛋白質(zhì)濃度范圍內(nèi)，蛋白質(zhì)和染料結(jié)合符合比爾定律（Beer’slaw），因此可以通過測定染料在595nm處吸收的增加量得到與其結(jié)合的蛋白質(zhì)量。本法測定范圍為10~100µg蛋白質(zhì)。由于該法簡單、迅速、干擾物質(zhì)少、重復(fù)性好、靈敏度...
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2016
7.14

堿性磷酸酶的分離提取及比活力的測定

堿性磷酸酶的分離提取及比活力的測定一、實驗原理堿性磷酸酶（alkalinephosphataseEC3.1.3.1簡稱為ALPase）廣泛存于微生物界和動物界。ALPase能催化幾乎所有的磷酸單酯的水解反應(yīng)，產(chǎn)生無機磷酸和相應(yīng)的醇、酚或糖。它也可以催化磷酸基團的轉(zhuǎn)移反應(yīng)，磷酸基團從磷酸酯轉(zhuǎn)移到醇、酚或糖等磷酸受體上。在磷的生物和化學(xué)循環(huán)過程中，ALPase起了及其重要的作用。在生物體內(nèi)ALPase與磷的代謝直接相關(guān)，參與磷與鈣物質(zhì)的消化、吸收、分泌以及骨骼的形成等生理生化過程...
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2016
7.14

酶的定義、特性及堿性磷酸酶于人體的意義

酶的定義、特性及堿性磷酸酶于人體的意義一、酶的定義：酶（enzyme）是具有催化特定化學(xué)反應(yīng)的蛋白質(zhì)、RNA或其復(fù)合體.是生物催化劑,能通過降低反應(yīng)的活化能加快反應(yīng)速度,但不改變反應(yīng)的平衡點.絕大多數(shù)酶的化學(xué)本質(zhì)是蛋白質(zhì).二、酶的特性：1.性：酶的催化效率比無機催化劑更高,使得反應(yīng)速率更快；2.專一性：一種酶只能催化一種或一類底物,如蛋白酶只能催化蛋白質(zhì)水解成多肽；3.多樣性：酶的種類很多,大約有4000多種；4.溫和性：是指酶所催化的化學(xué)反應(yīng)一般是在較溫和的條件下進行的；5...
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2016
7.13

Folin-酚試劑法（Lowry法）測定蛋白質(zhì)含量

Folin-酚試劑法（Lowry法）測定蛋白質(zhì)含量一、實驗原理蛋白質(zhì)含有兩個以上的肽鍵（—CO—NH）,因此有雙縮脲反應(yīng)，在堿性溶液中，能與CU2+形成絡(luò)合物。Folin-酚試劑反應(yīng)是在雙縮脲反應(yīng)的基礎(chǔ)上，引進Folin試劑（磷鉬酸-鎢酸試劑）,蛋白質(zhì)-銅絡(luò)合物能還原磷鉬酸-磷鎢酸試劑，生成藍色物質(zhì)。在一定條件下，藍色強度與蛋白質(zhì)的量成正比例。本法的優(yōu)點是操作簡便、靈敏度高、較此外吸收法靈敏10~20倍，較雙縮脲法靈敏100倍，反應(yīng)約在15min內(nèi)有zui大顯色，并至少可穩(wěn)定...
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2016
7.13

Hanus法測定不飽和脂肪酸的碘價

Hanus法測定不飽和脂肪酸的碘價一、實驗原理在適當(dāng)條件下，不飽和脂肪酸的不飽和鍵能與碘、溴或氯起加成反應(yīng)。脂肪分子中如含有不飽和脂?；茨芪盏?。100g脂肪所吸收碘的克數(shù)稱為碘價。碘價的高低表示脂肪不飽和程度的大小。由于碘與脂肪的加成作用很慢，故于Hanus試劑中加入適量溴，使產(chǎn)生溴化碘，再與脂肪作用。過量的溴化碘與脂肪作用后，測定溴化碘剩余量即可求得脂肪之碘價，本法的反應(yīng)如下：二、實驗用品（一）器材（1）碘價滴定瓶（250~300ml），或用具塞錐形瓶代替。（2）量筒...
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2016
7.11

蔬菜中膳食纖維的藥學(xué)價值和危害

蔬菜中膳食纖維的藥學(xué)價值和危害定儀：膳食纖維是指不能被人體消化道酵素分解的多糖類及木植素。英國國家顧問委員會建議膳食纖維攝入量為人均25-30g/天；美國FDA推薦的總膳食纖維攝入量為人均每日20-35g（成人）；澳大利亞有關(guān)機構(gòu)指出，人均每日攝入膳食纖維25g，可明顯減少冠心病的發(fā)病率和死亡率。中國營養(yǎng)學(xué)會2000年提出：我國成年人膳食纖維的適宜攝入量為每天30g左右。但據(jù)測算，我國人均每日的實際攝入量僅為14克左右，攝入量嚴(yán)重不足，且攝入量隨食品精加工水平的提高呈逐步下降...
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2016
7.7

微量凱氏定氮法測定蛋白質(zhì)總含量

微量凱氏定氮法測定蛋白質(zhì)總含量一、實驗原理天然有機物（如蛋白質(zhì)和氨基酸等化合物）的總氮量通常用微量凱氏定氮法（micro-kjeldahlmethod）來測定。當(dāng)被測的天然含氮化合物與濃硫酸共熱時分解出氨，氨與硫酸反應(yīng)生成硫酸銨，此過程稱為消化。由于消化過程進行緩慢，實驗中常添加硫酸鉀和硫酸銅的混合物來促進，硫酸銅是催化劑，硫酸鉀可提高消化液的沸點。氧化劑過氧化氫也能加速反應(yīng)。消化完成后，在凱氏定氮儀中加入強堿堿化消化液，使碳酸銨分解出氨。用水蒸汽蒸餾法將氨蒸入無機酸溶液中，...
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2016
7.6

膳食纖維的測定-標(biāo)準(zhǔn)方法

膳食纖維的測定-標(biāo)準(zhǔn)方法一、實驗原理膳食纖維又稱為植物細胞壁，它包括纖維素、半纖維素、木質(zhì)素、果膠、角質(zhì)和二氧化硅等。本實驗用中性洗滌纖維測定法測定，該法所測的膳食纖維為不被人消化系統(tǒng)中的酶所消化，也不被中性洗滌劑溶解的組分。其原理是樣品經(jīng)熱的中性洗滌劑浸煮后，殘渣用熱的蒸餾水充分洗滌，除去樣品中游離淀粉、蛋白質(zhì)、礦物質(zhì)，然后加入α淀粉酶溶液以水解結(jié)合態(tài)的淀粉，再用蒸餾水，丙酮依次洗滌，以除去殘存的脂肪、色素等，殘渣經(jīng)烘干，即為不溶性膳食纖維。二、實驗用品（一）器材（1）電熱...
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